優(yōu)諾Tabitha?氨基柱有專用的反相模式柱和正相模式柱,建議客戶專柱專用,在特別的情況下也可以同一支柱子在正相反相間切換,切換時(shí)用異丙醇作為過(guò)渡溶劑過(guò)渡。
反相模式柱出廠保存在純乙腈中,正相模式柱出廠保存在正己烷中,正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的, 需要特別留意,所以在使用前后要注意如下事項(xiàng):
PH范圍:2-8
柱溫:最高不超過(guò)60度
有機(jī)溶劑:最低不能低于60%的體積比
壓力:不超過(guò)3500PSI
使用中,不宜分析含醛基、羰基的化合物,不可用于還原糖的分析;
考察流動(dòng)相條件時(shí),建議pH由高到低的順序考察。
在pH<2條件下使用色譜柱后,填料表面有無(wú)法回到初始狀態(tài)的風(fēng)險(xiǎn)。
有時(shí)候需要長(zhǎng)時(shí)間平衡色譜柱。
平衡所需時(shí)間與流動(dòng)相的用量和鹽的濃度有關(guān),時(shí)間緊急時(shí),建議提高流速或pH不變?cè)黾欲}的濃度來(lái)進(jìn)行平衡。
樣品溶液的制備:
如可以的話,用流動(dòng)相來(lái)溶解或稀釋樣品;如不可以,請(qǐng)先檢查溶解后的樣 品在流動(dòng)相中的溶解度;進(jìn)樣前需使用 0.45 或 0.22μm 的濾膜過(guò)濾樣品;
再生:
- 正相條件:
依次用10倍柱體積的氯仿,異丙醇,二氯甲烷,流動(dòng)相分別進(jìn)行沖洗,如有壓力高現(xiàn)象,可按此程序進(jìn)行反沖色譜柱。
- 反相條件:
先用95%水:有機(jī)相沖洗至少10倍柱體積,除去所用緩沖鹽(不含緩沖鹽的流動(dòng)相可省去此步驟),再用95%有機(jī)相/水沖洗至少10倍柱體積并保存。
短期不用,可保存在反相溶劑中;長(zhǎng)期不用,需用異丙醇保存。